什么是類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor）？

RF(類風(fēng)濕因子)是許多不同抗體的可變混合物；這些抗體中有些結(jié)合其他抗體，有些是自身抗體(結(jié)合自身抗原的抗體)。

什么是嗜異性抗體？（heterophilic antibodies）

嗜異性抗體可以結(jié)合其他抗體。在人類樣本中，這些抗體或者是結(jié)合人類免疫球蛋白的自身抗體，或者是人類抗動(dòng)物免疫球蛋白抗體(HAIA)，包括人類抗小鼠抗體(HAMA)。

類風(fēng)濕因子和嗜異性抗體如何使ELISA結(jié)果不準(zhǔn)確？

在夾心法ELISA中，匹配的抗體對(duì)用于捕獲和檢測(cè)可溶性分析物。當(dāng)樣品中存在分析物時(shí)，正常情況可以測(cè)量到陽(yáng)性信號(hào)(如圖1A所示)。然而，血清和血漿中的干擾因素，如類風(fēng)濕因子(RF)和嗜異性抗體，會(huì)使檢測(cè)的capture和detection抗體交聯(lián)，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性信號(hào)和不準(zhǔn)確的分析物定量(如圖1B所示)。交聯(lián)使得無(wú)法區(qū)分特異性和非特異性信號(hào)，最終導(dǎo)致結(jié)果不可靠。如果要消除干擾，通常需要加入額外的樣品預(yù)處理步驟，例如通過(guò)PEG 6000沉淀或免疫球蛋白阻斷去除抗體。

為了有效消除類風(fēng)濕因子和嗜異性抗體所造成的假陽(yáng)性信號(hào)，提高分析結(jié)果的可信度，Mabtech推出ELISA PathRF kits，在這種ELISA形式中，detection抗體采用重組的單克隆抗體，并加入專門(mén)的RF-block diluent，避免了干擾的風(fēng)險(xiǎn)。(如圖1C所示)

Mabtech的ELISA PathRF試劑盒已通過(guò)含RF血漿的驗(yàn)證

使用一組不匹配的抗體來(lái)確定ELISA中獲得的信號(hào)是真信號(hào)還是假陽(yáng)性信號(hào)。這樣一組不匹配的抗體由與*不同的蛋白質(zhì)結(jié)合的capture和detection抗體組成。這種不匹配的設(shè)置不能產(chǎn)生真實(shí)的信號(hào)。然而，如果獲得了信號(hào)，這表明樣品中的RF因子交聯(lián)了capture和detection抗體，產(chǎn)生了假陽(yáng)性信號(hào)。

在來(lái)自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的100份血漿樣品中，Mabtech使用不匹配的ELISA抗體組觀察到高頻率的假陽(yáng)性結(jié)果。相比之下，ELISA PathRF沒(méi)有產(chǎn)生假陽(yáng)性信號(hào)(圖2)。

圖2. Rheumatoid arthritis患者(n=100)的血漿在不匹配的ELISA(針對(duì)不同靶標(biāo)的不匹配抗體組)或不匹配的ELISA PathRF中進(jìn)行測(cè)量。

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